LCP 晶体生长的预筛选
高蛋白质迁移率和快速扩散速率与结晶条件密切相关。
节省时间+金钱
帮助用户将研究重点集中在有利于 LCP 晶体生长的条件上。
方便+易于使用
只需单击几下即可开始对用户的结晶板进行全面分析，并将所有数据存储在一个地方。
找到 LCP 晶体生长的最佳条件，省去晶体生长过程，减少用户等待时间。
在设置结晶实验之前，您可以使用光漂白后的荧光再恢复 (FRAP) 快速筛选脂质立方相 (LCP) 条件。FRAP 是一种光学技术，用于评估蛋白质在 LCP 液滴中移动的难易程度。如果蛋白质聚集，或 LCP 结构崩溃，蛋白质将不会扩散，因此蛋白质也就不会结晶。FRAP 是提高结晶实验速度和排除次优条件的绝佳工具，无需用户等待晶体实际生长。
自动 FRAP 成像系统专为在 96 孔 LCP 结晶板上进行 FRAP 试验而设计。整个系统自动化且和便于使用，只需点击几下按钮即可开始对用户的结晶板进行全面分析。所有结果和分析都集成到 FORMULATRIX 的蛋白质晶体学专用软件实验室管理软件 (ROCK MAKER 和 ROCK IMAGER)中。
FRAP 是与 Vadim Cherezov (TSRI) 和 Ray Stevens 领导的 JCIMPT 中心合作开发的，并得到 国家卫生研究院共同基金（NIH Common Fund）结构生物学计划的支持。
预筛蛋白结晶条件
成功的LCP 结晶的主要因素之一是蛋白质在脂质双层内扩散的能力。蛋白质的扩散速率受蛋白质聚集、LCP 的结构特性和化学环境的影响。
扩散速率可以由 FRAP 确定，而 FRAP 测量标记蛋白的荧光强度在经过光学漂白的 LCP 液滴中的小区域内蛋白荧光自我恢复所需的时间。
用户使用 FRAP，可以在 50 分钟内筛选结晶实验，以确定蛋白质的迁移率以及该条件是否有利于形成蛋白质晶体。
数据收集选项
高通量
每个完整的 LCP-FRAP 过程大约需要 15-20 分钟。 为了提高通量，系统可以设置为仅收集最终状态荧光强度。
在这种高通量模式下我们仅测量蛋白质迁移率结果，这为研究人员提供了发现阳性条件所需的信息。大多数情况下，迁移率 >0.20 (20%) 是阳性条件的良好阈值。在此模式下，用户可以在 50 分钟内收集整个 96 孔板的迁移率数据。
完全再恢复
使用完全再恢复设置成像的液滴将在漂白时间（时间为零）之后进行更多次拍摄，以便更接近地拍摄到分子扩散并生成单分量或双分量贝塞尔函数曲线。
单分量再恢复曲线足以让大多数实验分析蛋白质的扩散速率和再恢复时间。但是，如果实验有两种不同类型的分子扩散，例如标记的脂质，则双分量贝塞尔函数曲线更合适。
数据收集选项
高通量
每个完整的 LCP-FRAP 过程大约需要 15-20 分钟。 为了提高通量，系统可以设置为仅收集最终状态荧光强度。
在这种高通量模式下我们仅测量蛋白质迁移率结果，这为研究人员提供了发现阳性条件所需的信息。大多数情况下，迁移率 >0.20 (20%) 是阳性条件的良好阈值。在此模式下，用户可以在 50 分钟内收集整个 96 孔板的迁移率数据。
完全再恢复
使用完全再恢复设置成像的液滴将在漂白时间（时间为零）之后进行更多次拍摄，以便更接近地拍摄到分子扩散并生成单分量或双分量贝塞尔函数曲线。
单分量再恢复曲线足以让大多数实验分析蛋白质的扩散速率和再恢复时间。但是，如果实验有两种不同类型的分子扩散，例如标记的脂质，则双分量贝塞尔函数曲线更合适。
快速简便的数据审查
FRAP 自动计算每一个蛋白液滴的迁移率。然后，迁移率大小与该条件下蛋白质形成蛋白质晶体的可能性相关。迁移率越大，结晶的可能性就越大。迁移率大小通过颜色编码的概览显示，让用户一眼就能发现阳性孔。
满足不同用户的工作流程和预算的不同型号
FRAP 有两种配置，以更好地满足不同用户实验室的需求：
一种是能够一次对两块结晶板成像的台式型号。这种最适合对通量无关紧要的实验室。
另一种是内置于 ROCK IMAGER 1000 的集成型号，这种可让用户装载多达 970 块结晶板并对其自动成像。该型号可以同时对两块结晶板进行成像 - 一块使用可见光成像，一块使用 FRAP 成像。
FRAP - 台式：概述
Testimonials
FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching) measures membrane protein mobility in lipids in a high throughput fashion. The system utilizes an automated high throughput LCP-FRAP assay to prescreen membrane protein crystallization conditions.
Wenru Zhang
Leading Chinese Academic Lab
The RI1000 and FRAP are almost perfect. Very stable, very productive. Software is easy to follow, and the maintenance service is good and effective. Prices are a little higher than expected, but I have to say it worth it.
